Revista Methodo: Investigación Aplicada a las Ciencias Biológicas. Universidad Católica de Córdoba.
Jacinto Ríos 571 Bº Gral. Paz. X5004FXS. Córdoba. Argentina. Tel.: (54) 351 4517299 / Correo:
methodo@ucc.edu.ar / Web: methodo.ucc.edu.ar | ARTICULO ORIGINAL Rev. Methodo 2024;9(2):S19-22.
ARTÍCULO ORIGINAL Rev. Methodo 2024;9(2):S19-22
https://doi.org/10.22529/me.2024.9S(2)04
Recibido 23 Oct. 2024 | |Publicado 09 Dic 2024
Resistencia de Escherichia coli en aves silvestres de plazas
infantiles en Córdoba, Argentina
Antimicrobial resistance of Escherichia coli in wild birds from
children's playgrounds in Córdoba, Argentina
María del Pilar Zarazaga
1, 2
, María Guadalupe Ramos Demmel
2
,
Lucila Nadine Capovila Coombes
2
,
María Victoria Ciccarelli
2
, Mateo Cordoba Valente
2
, Selene De la Fuente Toledo
2
, Agustín Poli
2
, Abril
Santiago
2
, Nicolás Javier Litterio
1, 2
1. Facultad de Ciencias Agropecuarias, IRNASUS CONICET-Universidad Católica de Córdoba, Argentina.
2. Universidad Católica de Córdoba. Seminario de Salud Pública. Epidemiología aplicada.
Correspondencia: María del Pilar Zarazaga. Email: pzarazaga@ucc.edu.ar
Resumen
La creciente presencia de aves silvestres, especialmente palomas, en áreas urbanas ha suscitado
preocupaciones sobre su impacto en la salud pública, dado que pueden actuar como vectores de bacterias
que poseen genes de resistencia a los antimicrobianos y de patógenos zoonóticos. Este estudio se centró en
el aislamiento, identificación y evaluación del perfil de resistencia de Escherichia coli en materia fecal de
aves silvestres en plazas recreativas infantiles de Córdoba, Argentina. Se recolectaron 14 muestras de
materia fecal, de las cuales se aislaron seis cepas de Escherichia coli. Se observó un 67% de cepas
resistentes al florfenicol, un 50% a enrofloxacina y gentamicina, un 33% a estreptomicina, tetraciclina y
trimetoprim-sulfametoxazol, y un 16% a ceftiofur. Además, el 50% de las cepas fueron resistentes a más
de un antimicrobiano, y el 33% resultaron ser multirresistentes. La presencia del gen eaeA, relacionado con
cepas patógenas, se confirmó en las seis cepas aisladas. Estos hallazgos sugieren que la materia fecal de
aves silvestres en plazas de Córdoba podría representar un riesgo zoonótico, especialmente para los niños
que utilizan estos espacios.
Palabras claves: Escherichia coli, resistencia antimicrobiana, reservorio, salud pública, aves
silvestres.
Abstract
The increasing presence of wild birds, particularly pigeons, in urban areas has raised concerns about their
impact on public health, as they can act as vectors for bacteria with antimicrobial resistance genes and
zoonotic pathogens. This study focused on the isolation, identification, and evaluation of the resistance
profile of Escherichia coli in fecal matter from wild birds in children's recreational areas in Córdoba,
Argentina. Fourteen fecal samples were collected, from which six Escherichia coli strains were isolated. A
67% resistance rate was observed for florfenicol, 50% for enrofloxacin and gentamicin, 33% for
streptomycin, tetracycline, and trimethoprim-sulfamethoxazole, and 16% for ceftiofur. Additionally, 50%
of the strains were resistant to more than one antimicrobial, and 33% were found to be multidrug-resistant.
The presence of the eaeA gene, associated with pathogenic strains, was confirmed in all six isolated strains.
These findings suggest that fecal matter from wild birds in Córdoba's parks could pose a zoonotic risk,
particularly to children using these spaces.
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Zarazaga M. P., Ramos Demmel M. G., Capovila Coombes L. N., Ciccarelli M. V., Cordoba Valente M., De la Fuente
Toledo S., Poli A., Santiago A., Litterio N. J. Resistencia de Escherichia coli en aves silvestres de plazas infantiles en
Córdoba, Argentina.
Revista Methodo: Investigación Aplicada a las Ciencias Biológicas. Universidad Católica de Córdoba.
Jacinto Ríos 571 Bº Gral. Paz. X5004FXS. Córdoba. Argentina. Tel.: (54) 351 4517299 / Correo:
methodo@ucc.edu.ar / Web: methodo.ucc.edu.ar| ARTICULO ORIGINAL Rev. Methodo 2024;9(2):S19-22.
Keywords: Escherichia coli, antimicrobial resistance, reservoir, public health, wild birds.
Introducción
La presencia de aves silvestres, especialmente
palomas, en áreas urbanas ha suscitado una
creciente preocupación por su impacto en la
salud pública. Estas aves son capaces de recorrer
grandes distancias dentro del entorno urbano, lo
que facilita la diseminación de patógenos,
muchos de los cuales tienen relevancia clínica y
epidemiológica
1
. Debido a su contacto cercano
con los humanos, en particular con niños en
espacios recreativos como plazas, las palomas
pueden actuar como vectores de patógenos
zoonóticos.
Además, las aves silvestres son ampliamente
reconocidas como portadoras de bacterias y
genes de resistencia a los antimicrobianos.
Aquellas que habitan cerca de entornos humanos
pueden adquirir bacterias multirresistentes a
partir de fuentes antropogénicas, como aguas
residuales urbanas y vertederos, actuando, así
como centinelas que reflejan la actividad
humana
2
. Por lo tanto, estas aves, que no están
expuestas directamente a agentes antibióticos,
pueden infectarse con bacterias resistentes a
través del contacto con un entorno contaminado
3
.
La aparición de bacterias resistentes a los
antibióticos se ha convertido en una
preocupación global en el ámbito de la salud
pública. En los últimos años, se han identificado
nuevos mecanismos de resistencia que afectan a
diversas clases de antimicrobianos, y estos están
propagándose a nivel mundial
4
. Este creciente
desafío exige una comprensión detallada de los
patrones de resistencia, lo cual es fundamental
para desarrollar estrategias efectivas de control y
mitigación
3
.
En este contexto, Escherichia coli presente en las
heces de las aves, es una bacteria valiosa para
estudiar, no solo porque puede portar y transferir
genes de resistencia, sino también porque posee
variantes patogénicas que afectan tanto a las
personas como a los animales. Por lo tanto, el
objetivo de este trabajo fue aislar, identificar y
evaluar el perfil de resistencia de Escherichia
coli en materia fecal de aves silvestres en plazas
recreativas infantiles de la provincia de Córdoba.
Material y método
Se recolectaron 13 muestras de materia fecal de
aves silvestres en plazas recreativas del área de
influencia de la ciudad de Córdoba, Argentina,
utilizando un muestreo totalmente aleatorizado
(Tabla 1). Las muestras se almacenaron en
frascos estériles de 50 ml, se identificaron y se
refrigeraron a 4 °C hasta su análisis.
Tabla 1. Plazas muestreadas de la provincia de
Córdoba, Argentina.
Antes del análisis, las muestras se clasificaron
según su consistencia en blandas o duras,
evaluando su porción sólida, líquida y su forma
(tubular bien formada o amorfa), con el fin de
determinar si las heces blandas podrían presentar
una mayor carga bacteriana que favoreciera el
aislamiento.
Cada muestra de materia fecal se sembró en agar
Eosina y Azul de Metileno (EMB) y se incubó a
37 °C durante 24 horas. A partir del crecimiento
bacteriano observable, se seleccionó una colonia
característica de color verde metálico,
correspondiente a Escherichia coli, de cada
muestra. Posteriormente, las colonias típicas
fueron sometidas a caracterización fenotípica
mediante pruebas bioquímicas convencionales.
Una vez confirmados los resultados de estas
pruebas, las cepas se crioconservaron a -80 °C.
Las cepas fueron expuestas a 10 antimicrobianos
de importancia tanto en salud pública como
animal5. Se utilizó la prueba de microdilución en
caldo
6
para estimar las concentraciones mínimas
inhibitorias de amoxicilina (AMX), ceftiofur
(CFT), enrofloxacina (ENR), estreptomicina
(EST), florfenicol (FLF), gentamicina (GEN),
tetraciclina (TET) y trimetoprim-sulfametoxazol
(TMT/SUL). Como control se empleó
Escherichia coli ATCC 25922 y para la
valoración de resistencia, se consideraron los
puntos de corte epidemiológicos (ECOFFs)
propuestos por EUCAST 2023
7
.
La técnica de PCR se empleó para la
determinación genotípica, permitiendo la
identificación de los genes eaeA, característicos
de Escherichia coli enteropatógena. Para extraer
el ADN, cada las cepas fueron suspendidas en un
buffer 10x, sometida a lisis en un baño seco a
100ºC durante 10 minutos, seguido de una
centrifugación a 1500 g durante 15 minutos a 4ºC
para obtener el sobrenadante de cada muestra.
Posteriormente, se evaluó la concentración y
pureza del ADN colocando 1 µl en el
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Zarazaga M. P., Ramos Demmel M. G., Capovila Coombes L. N., Ciccarelli M. V., Cordoba Valente M., De la Fuente
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Córdoba, Argentina.
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Jacinto Ríos 571 Bº Gral. Paz. X5004FXS. Córdoba. Argentina. Tel.: (54) 351 4517299 / Correo:
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NanoDropTM, midiendo la absorbancia de la
muestra.
Para evaluar la asociación entre la consistencia
de las heces y la presencia de Escherichia coli se
empleó como estimador a la razón de
prevalencias y el estadístico Chi cuadrado de
Fisher (p<0,05) mediante el programa
informático Win Epi (Universidad de Zaragoza©
2006).
Resultado y discusión
De las 13 muestras de materia fecal de aves
silvestres recolectadas en plazas, 8 presentaban
consistencia blanda y 5, consistencia dura. Se
aisló Escherichia coli en 4 muestras blandas y 2
duras (figura 1), lo que resultó en un porcentaje
de recuperación del 46%, ligeramente inferior al
62% reportado por Carlos et al. (2016)
8
. Es
importante destacar que, a diferencia de este
estudio, en el que las muestras se recolectaron del
ambiente, Carlos et al. obtuvieron las muestras
directamente de la cloaca de las aves capturadas.
Figura 1. Aislamiento e identificación de Escherichia
coli en materia fecal de aves silvestres mediante
pruebas bioquímicas. A) Siembra en agar EMB
mostrando colonias típicas de color verde brillante. B)
Pruebas bioquímicas para la confirmación, incluyendo
indol, TSI, lisina, citrato y urea.
El aislamiento de Escherichia coli fue 1,25 veces más
probable en muestras de materia fecal clasificadas
como blandas en comparación con las duras, de
acuerdo con la razón de prevalencias (tabla 2). Sin
embargo, esta diferencia no resultó estadísticamente
significativa (p > 0,05), posiblemente debido al
tamaño reducido de la muestra.
Tabla 2. Evaluación de la asociación entre
consistencia blanda/dura y la presencia de Escherichia
coli en materia fecal de aves silvestres de la provincia
de Córdoba (n=13).
El 67% de las cepas de Escherichia coli
mostraron resistencia a FLF, mientras que ENR
y GEN presentaron una resistencia del 50%.
Además, el 33% evidenció resistencia a EST,
TET y TMT/SUL, y solo se detectó un 16% de
resistencia a CFT (Tabla 3). Asimismo, el 50%
de las Escherichia coli analizadas fueron
resistentes a más de un antimicrobiano, y el 33%
resultaron ser multirresistentes. En comparación
con los hallazgos de Ahmed y Gulhan (2024)3,
donde el 63% de los aislados mostraron
resistencia a al menos un antibiótico y el 29%
fueron multirresistentes, este estudio halló cifras
superiores, con el 100% de las cepas de
Escherichia coli resistentes a un antimicrobiano,
el 50% a dos, y el 33% siendo multirresistentes
(resistentes a dos o más antimicrobianos). En su
estudio, la resistencia fue mayor en TET (52%) y
kanamicina (38%). Por su parte, Capita et al.
(2019)
9
informaron que más del 50% de las cepas
presentaron resistencia a antimicrobianos
considerados críticos, como ampicilina,
ceftazidima, estreptomicina y tetraciclina. Las
variaciones en las tasas de resistencia a diferentes
antibióticos observadas en el presente estudio
pueden atribuirse a diferencias en la presión
antimicrobiana entre regiones, en contraste con
los estudios comparados realizados en España y
Turquía.
Tabla 3. Perfil de resistencia (R) y silvestre “wild
type” (S) de Escherichia coli a diferentes
antimicrobianos en muestras de materia fecal de
palomas.
Los resultados de la PCR confirmaron la
presencia del gen eaeA, que codifica la proteína
íntimina, en las seis cepas de Escherichia coli
aisladas. Este gen indica la presencia de cepas
patógenas en la materia fecal de las aves
muestreadas. Además, el gen eaeA está
implicado en los mecanismos de adhesión y daño
celular.
Conclusión
La evidencia obtenida sugiere que la materia
fecal de las aves silvestres en las plazas de
Córdoba y zonas aledañas, podría contener cepas
de Escherichia coli resistentes a uno o más
antibióticos, lo que representa un factor de riesgo
zoonótico, especialmente para los niños que
frecuentan estos espacios recreativos. Es
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Zarazaga M. P., Ramos Demmel M. G., Capovila Coombes L. N., Ciccarelli M. V., Cordoba Valente M., De la Fuente
Toledo S., Poli A., Santiago A., Litterio N. J. Resistencia de Escherichia coli en aves silvestres de plazas infantiles en
Córdoba, Argentina.
Revista Methodo: Investigación Aplicada a las Ciencias Biológicas. Universidad Católica de Córdoba.
Jacinto Ríos 571 Bº Gral. Paz. X5004FXS. Córdoba. Argentina. Tel.: (54) 351 4517299 / Correo:
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fundamental ampliar los estudios
microbiológicos, incrementando el tamaño de
muestra, ya que actualmente constituye una
limitación del estudio. Este trabajo representa el
primer reporte regional sobre el aislamiento de
Escherichia coli multirresistente en materia fecal
de aves silvestres en áreas públicas.
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